穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比，每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉(zhuǎn)染試劑為什么會出現(xiàn)沉淀?cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑生產(chǎn)商

瞬時轉(zhuǎn)染方法：1.接種細胞：轉(zhuǎn)染前一晚，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)（不建議用胰酶）。調(diào)整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，每個孔置入的細胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復(fù)合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管，一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉(zhuǎn)染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時，去除生長培養(yǎng)基，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染1.5h后，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。4.孵育細胞和分析結(jié)果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后5h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達。請自行確定適合檢測時間。或者關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio支鏈PEI轉(zhuǎn)染試劑蛋白產(chǎn)量用PEI轉(zhuǎn)染試劑時出現(xiàn)沉淀什么原因?

產(chǎn)品特點：PEIMAX40K是線性聚乙烯亞胺鹽酸鹽形式（LinearPolyethylenimineHydrochloride），是線性化聚乙烯亞胺PEI25K的升級產(chǎn)品。相比于PEI25K，PEIMAX40K：1.完全水解（去乙酰化）；2.鹽酸鹽形式，具更高的水溶特性；3.含更長連續(xù)性乙烯亞胺片段，其質(zhì)子化氮水平比PEI25K提高11%以上。應(yīng)用領(lǐng)域：PEIMAX40K（cat#24765）是一款非GMP等級的PEI轉(zhuǎn)染試劑，適用于基礎(chǔ)學(xué)術(shù)研究和藥物研發(fā)早期階段，以固體粉末形式提供，需用戶自行配置（詳情見使用方法）。或者關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio

對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞，在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板，可適當降低鋪板密度，以確保轉(zhuǎn)染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞，可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細胞，但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！近期還有PEIfree申請活動，歡迎咨詢上海曼博生物！歡迎關(guān)注我們的公眾號Mine-bio，回復(fù)“PEI轉(zhuǎn)染試劑”即可領(lǐng)取！PEI轉(zhuǎn)染試劑會不會有毒性?

上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年，依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內(nèi)客戶群體，生命科學(xué)領(lǐng)域一站式供應(yīng)鏈體系，以及高風(fēng)險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢，曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術(shù)，引入中國市場，開發(fā)、孵育和推廣，致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術(shù)帶入中國，集中在為細胞/基因領(lǐng)域、/免疫，抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品，包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質(zhì)，轉(zhuǎn)染試劑、病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務(wù)，支持ATMP（AdvanceTherapyMedicinalProducts）藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉(zhuǎn)化。上海曼博生物是Polysciences官方授權(quán)dujia代理商，更多關(guān)于轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)問題，歡迎咨詢上海曼博生物！Polysciences是一家化學(xué)品制造公司，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于各個科研領(lǐng)域。公司成立于1961年，起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。歡迎關(guān)注我們的公眾號：Mine-bio，回復(fù)關(guān)鍵詞“申請PEI”，即可參加活動！更多關(guān)于Polysciences PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品信息，歡迎咨詢上海曼博生物！用PEI轉(zhuǎn)染時，一般和DNA的比例是?聚乙烯亞胺PEI轉(zhuǎn)染試劑廠家

哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑不含動物源成分？cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑生產(chǎn)商

產(chǎn)品簡介：Polysciences轉(zhuǎn)染試劑系列是基于聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）的產(chǎn)品，因其較高的轉(zhuǎn)染效果，已廣泛應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每“第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”體(protonsponge)。PEI可用作轉(zhuǎn)染試劑，它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細胞。有實驗證明，分子量為25000的線性PEI即Polysciences23966（PEI25K）轉(zhuǎn)染效率表現(xiàn)優(yōu)良。產(chǎn)品特點：適用于生產(chǎn)mABs、rAbs、bsABs和病毒載體(AVV、LV、BEV)；在HEK293、CHO和Sf9細胞系中高度有效；適用于從研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的各個階段；可預(yù)測，可大規(guī)模生產(chǎn)；兩周內(nèi)即可生成大量目標蛋白或病毒；高轉(zhuǎn)染效率；大量已發(fā)表的文獻支持。cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑生產(chǎn)商