本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來源的間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進行比較。羊膜來源間充質(zhì)干細胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來源的骨髓間充質(zhì)干細胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進行比較。在所有實驗中,每天都監(jiān)測細胞,每次傳代結(jié)束時,收獲細胞,并使用臺盼藍和一個自動細胞計數(shù)器計數(shù)然后繼續(xù)傳代。更多關(guān)于血小板裂解液的相關(guān)信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術(shù)文章!GMP等級的血小板裂解液是不含動物源成分的。FBS替代品血小板裂解液COA
細胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進行長期儲存)冷凍儲存時穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因為這會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時,只需預(yù)熱一份完整的細胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。更多關(guān)于血清替代產(chǎn)品——人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)口信息,歡迎咨詢上海曼博生物!賽多利斯血小板裂解液使用比例血小板裂解液的有效成分是什么呢?
美國Sexton Biotechnologies專注于細胞和基因zhi liao行業(yè)生產(chǎn)工具的開發(fā)和銷售,開發(fā)了適用于CGT行業(yè)生產(chǎn)的工具和產(chǎn)品,以實現(xiàn)細胞制造過程的靈活自動化和規(guī)模化,從而提高臨床結(jié)果成功的概率,減少上市時間和勞動力成本。Sexton目前已經(jīng)商業(yè)化的產(chǎn)品包括CellSeal低溫瓶(高通量細胞灌裝系統(tǒng),zhuan yong于細胞zhi liao產(chǎn)品的專業(yè)化存儲,耐-196℃)以及人血小板裂解液生長補充劑。更多Sexton人血小板裂解液相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,查看更多技術(shù)文章!
通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時,分化成脂細胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負面影響較為明顯。基于上述結(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應(yīng)結(jié)合自己的實驗條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。 更多Sexton血清替代相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio血小板裂解液里的有效成分是什么?
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血清替代里有哪些生長因子?FBS替代品血小板裂解液COA
在解凍的ELAREMPrime血小板裂解液中可能會形成不溶性顆粒。顆粒形成不會影響細胞培養(yǎng)性能。如果完全細胞培養(yǎng)基中出現(xiàn)凝結(jié)或不溶性顆粒,建議在ELAREMPrime血小板裂解液在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中稀釋后使用0.22μm過濾器過濾完全培養(yǎng)基。過濾不會影響細胞生長性能(經(jīng)過MSC測試)。但是,不建議對100%濃縮的ELAREMPrime血小板裂解液進行過濾。避免多次凍融循環(huán)ELAREMPrime血小板裂解液,可以很大限度地減少微粒的形成。無菌性ELAREMPrime血小板裂解液經(jīng)過無菌處理。微生物培養(yǎng)測試為陰性。質(zhì)量控制測試在經(jīng)過認證的測試實驗室進行。 更多關(guān)于血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!FBS替代品血小板裂解液COA