固體斜面培養基配制:培養基的過濾澄清,液體培養基必須一定澄清,瓊脂培養基也應透明無明顯沉淀,因此,須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養基可用濾紙過濾法,濾紙應折疊成折扇或漏斗形,以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。瓊脂培養基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾。新制肉、肝、血和土豆等浸液時、則須先用絨布將碎渣濾去,再用濾紙反復過濾。如過濾法不能達到澄清要求、則須用蛋清澄清法。即將冷卻至55~60°C的培養基放入大的三角燒瓶內,裝入量不得超過燒瓶容量的1/2,每1000ml培養基加入1~2個雞蛋的蛋白,強力振搖3~5分鐘,置高壓蒸汽滅菌器中、121°C加熱20分鐘、取出趁熱以絨布過濾即可。培養基的分裝,培養基的分裝,應按使用的目的和要求,分裝于試管、燒瓶等適當容器內。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,其外還須用防水紙包扎(現試管一般多有用螺旋蓋者)。分裝時較好能使用半自動或電動的定量分裝器。液體培養基在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。重慶瓊脂滅菌 培養基制備儀
固體斜面培養基配制:培養基各成份的混合和溶化:培養基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,以防有微量銅或鐵混入培養基中,使細菌不易生長。較好使用不銹鋼萵加熱溶化,可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動、以防焦化、如發現有焦化現象、該培養基即不能使用,應重新制備。待大部分固體成分溶化后,再用較小火力使所有成分完全溶化,迄至煮沸。如為瓊脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,因蒸發而丟失的水分,較后必須加以補足。培養基pH的初步調正:因培養基在加熱消毒過程中、pH會有所變化,培養基各成分完全溶解后,應進行PH的初步調正。重慶瓊脂滅菌 培養基制備儀培養平板培養基也叫平面培養基、平皿培養基。
含瓊脂的培養基有時在平板上不凝固或凝固不好問題:在此種情況下,建議對于需要高壓滅菌的培養基,倒入平板前先搖一搖。主要是瓊脂培養基的分子量比較大,在冷卻過程中容易沉淀到底,造成瓊脂不能均勻分布。對于無需高壓滅菌的培養基,不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重復三至五次煮沸溶解過程,因一次無法保證瓊脂完全溶解。微生物培養基成分中含有染料或指示劑;不同批次的粉狀培養基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高,顏色越深;研磨時間越長,顏色越深等三個原因。
干粉培養基有哪些注意事項:①熔化培養基制備必須在玻璃容器中進行,如果使用銅或鐵器皿,會影響細菌的生長。②注意按照先加水再加顆粒干粉培養基順序,反之則不利于培養基溶解。③單在必要時進行加熱溶解操作,其加熱溫度也不要過高時間不要過長,主要原因是高溫會破壞瓊脂和培養基中的一些營養成分。④生產的干粉培養基和顆粒培養基都經過pH校準,使用時無需特殊驗證。因為高壓會影響pH值,則應在高壓后驗證pH值。⑤液體培養基通常是預先包裝好的,分裝時應注意每管的用量不得高于試管的三分之二。⑥高壓后冷卻至五六十度環境,再導入平板,否則會形成更多的水蒸氣,導致細菌分離數量。基礎培養基各種微生物的營養要求雖不相同,但多數微生物需要的基本營養物質相同。
培養基的儲存:干粉培養基應保存在陰涼干燥處,要避免陽光直射;未開瓶的培養基在室溫下的較長保存2年,開瓶后的干粉培養基易吸濕,應注意防潮并在6個月內用完。應定期對儲存中的培養基進行常規檢查,如容器密閉性復查、一次開封日期、內容物的感官檢查,如果培養基發生結塊、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。培養基的制備和使用是微生物實驗室檢測工作的重要環節,培養基自身質量的優劣、保存是否得當、配制使用是否正確等都直接影響到檢測結果的準確性。要根據不同微生物的營養需求選擇適宜的營養物質,配制針對性強的培養基。重慶瓊脂滅菌 培養基制備儀
牛肉浸液中加入適量的蛋白胨、氯化鈉、磷酸鹽,調節pH7.2~7.6,經滅菌處理后,即為基礎液體培養基。重慶瓊脂滅菌 培養基制備儀
固體培養基的制作步驟:1、首先我們要準備好一個裝有1000ml的燒杯,然后在準備好的杯中在放入500ml的蒸餾水,在將牛肉膏和蛋白胨、氯化鈉這些都溶解在水中。2、其次我們在調節PH值,調節時需要百分之10的氫氧化鈉溶液,將PH值調到7.2,在此也要定容到1000ml,較后在將這些液體都分別放入10個錐形瓶內,每一瓶都裝100ml。3、然后我們再把剪碎的瓊脂放進五個錐形瓶里,在給每個錐形瓶中放入2.4克,然后在把這十個錐形瓶瓶口都弄上棉花塞,瓶子也要弄上報紙。4、較后我們就可以將剛才所包扎好的一些錐形瓶放入滅菌鍋里,滅菌時一定要記得滅菌十分鐘,十分鐘到了之后,在將錐形瓶拿出來,冷卻之后就成了固體培養基了。注意事項:倒入時一定要注意容易。滅菌時間十分鐘,要看好時間。注意事項:倒入時一定要注意容易。滅菌時間十分鐘,要看好時間。重慶瓊脂滅菌 培養基制備儀
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